當前位置:首頁 >> 技術成果 >> 技術文章
技術成果
技術文章 成果展示

SD大鼠乳鼠心臟微血管內皮細胞原代分離培養方法

發布日期:2022-11-09 瀏覽次數:975

1.將新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min,開胸,取出心臟后于含有雙抗的預冷過的D-HANKS中漂洗兩遍,移入超凈臺。

2.仔細剪除大血管,左右心房及右心室和室間隔,保留左心室,去除內、外膜,PBS清洗。

3.用眼科剪將心室肌剪碎至約1mm3,滴加1ml胎牛血清,均勻接種于6cm細胞培養皿內,組織塊間隔1-2mm,放入5% CO2,37℃恒溫培養箱內培養。

4.4小時后去除培養皿,加入3ml含有20%FBS和1%雙抗的H-DMEM培養基,繼續培養。

5.一般情況下48小時后可見有細胞爬出,換新鮮培養基繼續培養。

6.5-7天后有大量細胞鋪滿皿底,棄去培養基,用PBS清洗一遍,加入2ml胰酶進行消化1分鐘左右。

7.吸去胰酶。加入完全培養基終止反應,并用移液器反復吹打。

8.傾斜培養皿稍等片刻,讓組織塊沉淀后吸去上層細胞懸液,70μm細胞篩過濾后接種至12孔板為后續共培養試驗做準備。



欧美性受xxxx黑人猛交,综合图片亚洲网友自拍,国产微拍一区二区三区四区,亚洲一区二区三区免费视频